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細菌內(nèi)毒素檢測方法都有哪些?

瀏覽數(shù)量: 0     作者: 本站編輯     發(fā)布時間: 2024-05-20      來源: 本站

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細菌內(nèi)毒素檢測方法都有哪些?

細菌內(nèi)毒素系指革蘭氏陰性菌細胞壁上的一種脂多糖和蛋白的復(fù)合物,細菌死亡或自溶后會釋放內(nèi)毒素,內(nèi)毒素大量進入血液會引起發(fā)熱反應(yīng)-“熱原反應(yīng)”。

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細菌內(nèi)毒素檢查法利用鱟試劑檢測或量化由革蘭氏陰性菌產(chǎn)生的細菌內(nèi)毒素,以判斷樣品中內(nèi)毒素限量是否符合規(guī)定。其原理是內(nèi)毒素活化鱟試劑中的C因子,使鱟試劑發(fā)生一系列酶聯(lián)反應(yīng),最終形成凝膠或使凝固酶活化外加的顯色基團原理,來檢測細菌內(nèi)毒素含量。

主要檢測方法分為凝膠法和光度法。


凝 膠 法


凝膠法主要用于內(nèi)毒素的定性和半定量,雖是內(nèi)毒素檢測的標準方法,但檢測范圍有局限性,且對檢測用水和檢測條件均有要求。

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光度法

光度測定法又分為濁度法和顯色基質(zhì)法,濁度法包括動態(tài)濁度法和終點濁度法,顯色基質(zhì)法分為動態(tài)顯色法和終點顯色法,可定量檢測內(nèi)毒素含量。

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濁度法是通過內(nèi)毒素與鱟試劑的C因子產(chǎn)生反應(yīng),由此激活的凝固酶會切斷凝固蛋白原中的精氨酸肽鏈,形成凝膠狀蛋白;而顯色基質(zhì)法,則是通過測定內(nèi)毒素與鱟試劑反應(yīng)時產(chǎn)生的凝固酶使某種特殊底物釋放出來的生色團的量,來檢測內(nèi)毒素含量的鱟試驗法。

凝膠法vs光度法


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